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DNA合成儀在生物學(xué)中的應(yīng)用
更新時(shí)間:2021-09-02   點(diǎn)擊次數(shù):595次

DNA合成儀在生物學(xué)中的應(yīng)用

        DNA合成儀在分子生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用非常廣泛,大致可以概括為以下幾個(gè)方面。
         1、合成PCR引物、DNA測(cè)序引物和雜交探針
        2、合成生物素標(biāo)記DNA包括生物素標(biāo)記引物
        對(duì)于DNA的固相測(cè)序(solid-phasesequencing),使用生物素標(biāo)記的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后使用親和素捕獲擴(kuò)增產(chǎn)物。由于親和素與磁珠共價(jià)結(jié)合,擴(kuò)增產(chǎn)物可以被磁鐵吸附捕獲,大大簡(jiǎn)化了DNA測(cè)序模板的純化步驟。此外,生物素標(biāo)記的探針用于非放射性雜交檢測(cè)。 DNA合成儀可用于合成生物素標(biāo)記的探針和引物。
         3.合成熒光素標(biāo)記DNA包括熒光素標(biāo)記引物
        合成的DN A 片段5端可標(biāo)記幾種不同顏色的熒光素(6-FAM、TET、HEX),可用于DNA自動(dòng)測(cè)序儀,也可用于PCR片段大小分析和定量分析,即基因組分析和基因表達(dá)水平研究。此外,熒光素標(biāo)記的探針用于原位PCR雜交檢測(cè)以定位染色體上的基因。包括熒光素標(biāo)記引物的熒光素標(biāo)記DNA可以使用DNA合成儀合成。
         4. 合成反義核酸
        反義核酸可用于反義調(diào)控和基因治療。反義調(diào)控是指體外合成與靶序列互補(bǔ)的DN A 片段,轉(zhuǎn)化細(xì)胞后與靶序列結(jié)合,即在轉(zhuǎn)錄水平抑制基因表達(dá),但由于細(xì)胞內(nèi)的限制酶系統(tǒng)降解外源核酸,反義核酸必須經(jīng)過(guò)硫化修飾,然后才能轉(zhuǎn)化到細(xì)胞中。此外,癌癥、艾滋病等也可以用反義核酸在基因水平上進(jìn)行治療。 DNA合成儀是合成反義核酸的儀器。
         5. 磷酸鹽標(biāo)記 DNA 的合成
        利用DNA連接酶加入合成的磷酸標(biāo)記DN A 片段,進(jìn)行體外基因構(gòu)建。磷酸鹽標(biāo)記的 DNA 通常由 DNA 合成儀合成。
         6. 合成 RNA
        用 DNA 合成儀合成的 RNA 主要用于核酶研究。核酶可以作為生物dao彈轉(zhuǎn)化到細(xì)胞中,以切割致癌基因等患病基因。

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